呼吸道感染性疾病在臨床中很常見,而冬春季節(jié)更是呼吸道感染的高發(fā)季節(jié)。呼吸道感染分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。2019 年世界衛(wèi)生組織( World Health Organization,WHO) 公布的全球主要死亡原因中就包括了呼吸道感染,下呼吸道感染仍然是世界上病死率最高的感染性疾病之一,排在主要死亡原因的第四位。兒童是呼吸道感染的易感人群,近期呼吸道感染病原體在兒童中排名前三位的為流感、腺病毒、呼吸道合胞病毒,第四位為肺炎支原體,呈現(xiàn)出多種病原體共同流行的態(tài)勢。不同呼吸道病原體感染引起的臨床癥狀、體征相似,因此,臨床醫(yī)師僅僅依靠臨床癥狀、體征,很難對疾病作出準確的病原學診斷。在沒有明確的病原微生物學診斷的情況下,治療上容易出現(xiàn)廣譜抗菌藥物和糖皮質(zhì)激素類藥物的濫用,或者延誤治療。病原體的快速檢測和精準診斷是其有效治療的前提。在多種呼吸道病原體共同流行的高發(fā)季節(jié),感染過一種呼吸道傳染病的人還有可能感染其他種類,出現(xiàn)混合感染、先后感染。因此,一次對多種病原體同時進行檢測,可以極大地提升診斷效率,輔助臨床醫(yī)生進行鑒別診斷以及識別混合感染的風險。傳統(tǒng)微生物學及免疫學技術(shù)對呼吸道病原體檢測的靈敏度偏低,而核酸檢測技術(shù)的發(fā)展和臨床應(yīng)用大幅度提高了呼吸道病原體的診斷能力。多重核酸檢測方法可以在同一份標本中檢測出多種病原體,提示存在混合感染的情況,通過病原體相對載量高低,可以判斷哪種病原體是主要病原體?;蛘咄ㄟ^聯(lián)合不同檢測方法,確定致病病原體。例如:1.呼吸道13種病原體多重檢測方法:是用PCR毛細電泳片段分析法,可在一份標本中檢測的病原體包括:甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1(2009)、季節(jié)性H3N2病毒、乙型流感病毒、偏肺病毒、腺病毒、博卡病毒、肺炎支原體、鼻病毒、冠狀病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、衣原體。標本:①痰液:深部咳痰,≥1mL;②咽拭子:一次性植絨拭子采集,裝入3ml細胞保存液。2. 六項呼吸道病原菌核酸檢測項目:是利用熒光PCR檢測方法,可以同時檢測六種呼吸道病原菌,包括:肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、軍團菌。標本:痰液,肺泡灌洗液,胸腔積液。3.肺炎支原體核酸檢測:是利用熒光PCR檢測方法檢測肺炎支原體DNA或RNA。標本:咽拭子,痰液,肺泡灌洗液,胸腔積液。肺炎支原體核酸檢測非常靈敏,且特異性高,發(fā)病初期,選擇核酸檢測;肺炎支原體抗體IgM一般在感染后4~6天才能產(chǎn)生,3周左右達到高峰,持續(xù)存在2~4個月甚至更長時間,所以發(fā)病初期可能檢測不到,發(fā)病一周以上,可以選擇抗體檢測,或者兩種結(jié)合檢測。4.mNGS應(yīng)用高通量測序:無偏倚性提取標本中全部的核酸,通過生物信息分析,獲得疑似致病微生物的種屬信息。具有準確性和可靠性高、 可提供大量的生物信息、對未知病原確認快、周轉(zhuǎn)時間短等優(yōu)點。因而在急危重癥、疑難及混合感染診斷方面具有明顯的優(yōu)勢。但因成本高,不推薦作為輕癥感染性疾病的一線檢測。通過病史、臨床表現(xiàn),選擇合適的病原體檢測方法,結(jié)合血常規(guī)等常規(guī)檢驗項目及影像學檢查等方法,臨床醫(yī)生可以根據(jù)不同病原體選擇合適的抗菌藥物或抗病毒藥物,減少廣譜抗菌藥物的濫用,促進疾病的恢復(fù),減輕病人的經(jīng)濟負擔。
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